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细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)

产品属性本产品采购属于商业贸易行为

  • 市场价格: 电议
  • 产品型号:
  • 更新时间: 2022/2/24 19:41:31
  • 发布时间: 2022/2/24 19:41:31
  • 生产地: 中国大陆
  • 访问次数: 14次
  • 公司名称: 上海谷研实业有限公司

企业档案

上海谷研实业有限公司

6 营业执照已上传

企业类型:经销商

公司地址:上海松江区新砖公路1290号

主营产品:elisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

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产品简介

细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)公司正在热销的产品:人血红蛋白C(HbC)ELISA试剂盒
人纤维蛋白(Fibrin)ELISA试剂盒
人血纤肽/纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒
人纤溶酶原激活剂(PLGA)ELISA试剂盒
人膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA试剂盒

详细内容

公司简介

实验报告:
一,分离与培养:
    1,无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
    2,往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
    3,剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
    4,用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
    5,差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二,免疫荧光鉴定:
    1,待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
    2,PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3,PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
    4,按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
    5,PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
    6,用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)
英文名称:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
产品规格:20 rxn
发货周期:1~3天
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒是用FITC标记了的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生,可用荧光显微镜,流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。
其检测原理为:在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
另外,本试剂盒中还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。
储存条件:4℃,有效期一年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证,价格优惠,实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格,说明书,规格,用途,实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服,戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型,凋亡诱导剂种类,使用的检测红足1世旧版不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
聚乙烯 6-98 Mw ~47,000兔子抗性酶5b(TRAP5b)免疫试剂盒10号染色体开放阅读框93抗体RAG2  重组激活因2蛋白抗体
聚乙烯 8-88 Mw ~67,000兔子巨噬炎性蛋白5(MIP-5)免疫试剂盒10号染色体开放阅读框63抗体RAG1/RNF74  环指蛋白74抗体(重组激活因1)
四氧化三钴 CP,Co 72.0~73.5%兔子巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫试剂盒10号染色体开放阅读框132抗体RAE1  mRNA结合蛋白抗体
四氧化三钴 99.9% metals basis兔子巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫试剂盒10号染色体开放阅读框30抗体Radixin  根蛋白抗体
钴锂 99.8% metals basis兔子紧密连接蛋白1(ZO1)免疫试剂盒10号染色体开放阅读框140抗体RAD9  周期检查控制蛋白质抗体
乙酰 AR,98.5%兔子金属硫蛋白2(MT-2)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框125抗体RAD54B  DNA修复和重组蛋白RAD54B抗体
乙酰溴 97%兔子结缔组织生长因子(CTGF)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框129抗体Rad52  Rad52抗体
三乙苄化铵 98%兔子窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框159抗体RAD51C  癌和卵巢癌易感因RAD51C抗体
异丁酰 98%兔子胶原酶II(Collagenase II)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框163抗体Rad51  Rad51抗体
酰溴  95%兔子胶原酶I(Collagenase I)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框172抗体RAD50  DNA修复蛋白Rad50抗体
酰 98%兔子降钙素(CT)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框2抗体RAD21  核质蛋白21抗体
四丁溴化铵 CP,98.0%兔子碱性成纤维生长因子(bFGF)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框19抗体Rad17/RFC  周期检控Rad17蛋白抗体(复制因子C)
四乙溴化铵 98%兔子状腺素(T4)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框25抗体Racamine /PAYLEAN (1B12)  小鼠抗莱克多巴单克隆抗体
蒽醌 CP兔子质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框31抗体RACK1  受体激活蛋白激酶C1抗体
2-萘 97%兔子质金属蛋白酶9(MMP-9)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框51抗体RACGAP1  Rho GTP酶激活蛋白GAP抗体
细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)氧化蛋白质水解酶Human IGHD ELISA KitD(-)樟脑磺酸
铁调节蛋白2抗体Human IGKV1-5 ELISA Kit葡聚糖T5
乙脱氢酶1型抗体Human IGSF8 ELISA Kit人痢疾内阿米巴抗原ELISA试剂盒,
AFP4a蛋白抗体Human IGSF11 ELISA Kit人吖啶橙(AO)ELISA试剂盒,
Rho GTP酶激活蛋白32抗体Human IGSF21 ELISA Kit人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒,
能量平衡相关蛋白抗体Human IKZF3 ELISA Kit小鼠白介素18(IL-18)ELISA试剂盒,
禽脑脊髓炎病AEV抗体Human IMMP2L(Mitochondrial inner membrane protease subunit 2) ELISA Kit防御素1-3(HNP1-3)ELISA试剂盒,
腺苷酸环化酶7抗体Human ILKAP ELISA Kit人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒,

关键词:细胞凋亡检测  试剂盒  Annexin  V-FITC/PI  

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